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蛋鸡舍环境气载微生物含量与分布监测

2019年 04月 24日 今日养鸡经验网
养鸡经验
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【摘要】为评估不同养殖模式鸡舍环境卫生质量。采用7ryk一6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器,对封闭式和开放式蛋鸡舍环境中的微生物气溶胶浓度及大肠杆菌血清型的分布进行监测。结果显示:封闭式鸡舍微生物气溶胶的含量、大肠杆茵检出量均明显低于开放式鸡舍,两者优势血清型均为;发病鸡舍气载大肠杆菌和鸡源大肠杆菌血清型存在一致性,且病鸡舍气载大肠杆菌颗粒多分布于采样器的第3-5级介质中。结果表明:封闭式鸡舍养殖环境优于开放式环境,有利于大肠杆茵病的防控。

现代集约化的养殖模式使蛋鸡处于与外界隔绝状态,鸡舍环境质量对蛋鸡的生产性能和机体健康影响不容忽视。鸡舍环境中微生物及其代谢产物形成的气溶胶,不仅因污染鸡舍内环境而影响动物的健康,有时还能感染工作人员。

在细菌气溶胶中,虽然革兰氏阴性菌仅占较小的比例,但其中包含了大量的致病菌和条件性致病菌,是动物细菌性疾病的指征。其中大肠杆菌作为畜禽舍及其周围环境的一种常见菌,常被作为农业环境等污染状况的指示细菌,也是评价畜禽舍空气环境质量的一个重要指标瞳1。根据o抗原进行分类,大肠杆菌现已有180多种不同血清型。大肠杆菌o抗原是大肠杆菌细胞最外侧结构,由多个重复的单糖单位组成,是构成大肠杆菌脂多糖的重要组成部分。其单糖种类、数量以及单糖间键,寡糖单位之间键的不同构成了o抗原的多样性。

本研究旨在探讨不同养殖模式鸡舍环境微生物气溶胶的含量,气载大肠杆菌的构成与分布,从而对畜禽舍的环境状况做出客观评估。

1材料与方法

1.1材料

培养基、细菌微量生化反应管均购自杭州天和微生物试剂有限公司,大肠杆菌o抗原单因子血清由中国兽医药品监察所提供。tyk一6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器(盐城天悦仪器仪表有限公司);菌落计数器。

1.2采样点的选择

对9家蛋鸡养殖场的15栋蛋鸡舍进行空气采样,每栋鸡舍内设5个采样点,分别设在4个角(距横向墙壁3 m)和鸡舍中央,采样箱的高度为1.5 m。采用tyk一6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器,采样时间为5 min,气体流量为28.3in,采样量为141.5 l。采样时间2014年11月一2015年1月,每个月采集1次,连采3次。

封闭式鸡舍饲养管理:人工光照;自动控制调节温、湿度和通风;早晚2次自动清粪;机械化供水、喂料,水线消毒1次阴;喷雾消毒,1次/周。开放式鸡舍饲养管理:自然光照辅助人工光照;舍内温度设定为17~26℃;根据舍内温度控制通风量;l天早晚2次进行清粪;水线消毒1次,月;喷雾消毒,1次/周。

1.3鸡舍空气细菌总数及细菌粒径分布

营养琼脂采样后置37℃培养24 h,记录营养琼脂培养基中的菌落总数,按下式计算细菌总数。

1.4气载大肠杆菌生化鉴定

经过选择性培养基培养24 h后,进一步分离纯化,对疑似大肠杆菌菌株进行生化鉴定。

1.5 气载大肠杆菌血清型鉴定及分布

采用大肠杆菌o抗原单因子血清,玻板凝集试验鉴定血清型,并统计其分布。

1.6鸡源大肠杆菌血清型鉴定及分布

试验期间,两家开放式养殖场疑似大肠杆菌流行。根据临床症状、病理剖检变化,对疑似大肠杆菌发病鸡舍进行空气采样,染色镜检、分离纯化、生化试验和血清型鉴定。同时采取患病鸡肝脏,进行染色镜检、分离纯化、生化试验和血清型鉴定。记录血清型分布。

1.7数据统计与分析

采用sas 9.1版统计软件,duncan氏多重比较,对不同处理之间进行单因素方差分析(anova),试验数据以(平均值标准差)表示,p0.05为差异显著,po.01为差异极显著。

2结果与分析

2.1 鸡舍空气菌落总数、细菌分布

由表l可知,两种不同养殖模式的鸡舍空气细菌总数相比较,全封闭式细菌总数明显低于开放式养殖模式,差异显著(p0.05)。从分布情况来看,l~4级分布最多,尤其是1级细菌含量最高。

蛋鸡舍环境气载微生物含量与分布监测

2.2大肠杆菌主要血清型及分布

经过对139株大肠杆菌血清型鉴定,除19株未定型外,共鉴定出14种血清型,其中优势血清型为o舒和o。分别占46.04%和16.54%。在封闭式养殖场分离到了40株(7株未定型)大肠杆菌,7个血清型,优势血清型为o。,(40%)、oⅢ(10%)和o,。(7.5%)。在开放式养殖场分离到了99株(12株未定型)大肠杆菌,13个血清型,优势血清型为o酷(49.5%)、o,。.(18.2%)。结果见表2。

蛋鸡舍环境气载微生物含量与分布监测

2.3发病鸡舍气载和鸡源大肠杆菌的血清型分布

从两家开放式养殖场不同发病鸡舍空气环境中鉴定出的气载大肠杆菌,其优势血清型分别为

o。,和oⅢ,分别占52.3%和38.9%(见表3)。

由表3可知:发病鸡舍鉴定出的气载大肠杆菌和鸡源大肠杆菌血清型存在一致陛,且病鸡舍气载大肠杆菌颗粒多分布于采样器的第35级介质中。

3讨论

3.1 养殖模式和气溶胶含量的关系

世界卫生组织认为,空气细菌浓度达到700~1 800cm3,是发生经空气感染的明显因素,当空气细菌浓度180 cm3时,就安全很多。本试验表明,封闭式鸡舍单位面积菌落总数为225.8 c弛,m3,虽然大于世界卫生组织对于空气细菌浓度的最低安全界限,但要远远低于其规定空气感染的低限700 cm3。而开放式鸡舍的细菌浓度比l 800 cwm3高出将近l倍。说明冬季禽舍内空气环境受饲养模式的影响很大。而且空气中的细菌总数越高,存在致病性微生物的可能性越大,对动物健康威胁也越大,造成动物死亡率越高b1。在试验期间发生大肠杆菌病的两个养殖场也都是开放式鸡舍,也印证了这一观点。

3.2鸡舍大肠杆菌气溶胶分布

细菌气溶胶致病与其粒径大小有关h]。大于10斗m的粒子(相当于6级采样器1级)被阻留在鼻腔内,5~10斗m(相当于6级采样器2级)的粒子可到达支气管,5斗m(相当于6级采样器3~6级)以下的可进入细支气管和肺泡。

本研究结果显示:

封闭式模式分离到的大肠杆菌共40株,且气溶胶3~6级分布较少,占40.8%。开放式模式分离到的大肠杆菌共99株,气溶胶36级分布占61.3%。试验期间两个开放式养殖场发生大肠杆菌流行也说明,高浓度的革兰氏阴性肠杆菌气溶胶,尤其是小颗粒气溶胶浓度大,是造成呼吸道感染的重要因素。

3.3 气栽大肠杆菌和鸡源大肠杆菌血清型关系

本研究发现,河北省冀南地区大肠杆菌优势血清型为o。,、o,。,和o,。。从两个发病鸡舍分离鉴定的大肠杆菌气溶胶和鸡源大肠杆菌血清型均一致,说明鸡舍大肠杆菌病的暴发流行可能与气源性相互传播有关。但其同源性还需要进一步研究。许亚卓等№1发现,o。,,大肠杆菌和血清型为o扒o,玑o。鸵大肠杆菌出现混合血清型现象,原因是o。,。大肠杆菌0抗原基因与混合血清型o:。、o。o。。:大肠杆菌的o抗原基因之间的进化关系较密切。本试验中o酗和。,。,o。。。和o巧抗原基因之间的进化关系还有待于进一步研究。

综上所述,冬季封闭式养殖模式舍内空气质量优于开放式养殖模式。

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